腺病毒介导p27mt基因转移诱导恶性黑素瘤细胞凋亡的实验研究

摘要

目的:探讨突变型p27基因(p27mutabt type gene;p27mt)对恶性黑素瘤A375细胞凋亡的调节作用.方法:利用重组腺病毒Ad-p27mt转染培养的人恶性黑素瘤A375细胞,用3H-TdR掺入法测细胞增殖;流式细胞术、DNA片段分析法、TUNEL法检测细胞凋亡.结果:重组腺病毒Ad-p27mt在MOI≥50时,可达到100%的转导效率.Ad-p27mt转染恶性黑素瘤细胞A375后,3H-TdR掺入法检测发现细胞增殖抑制;流式细胞术检测在G1期前出现亚二倍体凋亡峰;细胞DNA抽提电泳后发现凋亡特征性梯带.TUNEL法检测凋亡指数分别为48.5±3.6(Ad-p27mt组)及4.2±0.8(空白对照组),差异有显著性(P＜0.01).结论:重组腺病毒介导的p27mt基因转移可诱导恶性黑素瘤A375细胞在G1期阻滞并导致细胞凋亡.