ALI时MicroRNA-21通过PTEN调控PI3KAKT途径影响MSC存活的研究

摘要

目的 观察急性肺损伤(acute lung injury,ALI)时miRNA-21通过磷酸酯酶一张力蛋白同源物(phosphatase and tensin homolog,PTEN)调控PI13K/AKT信号通路途径影响间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSC)存活情况.方法 选择体外通过H2O2/SD刺激MSC,观察MSC凋亡和增殖情况,然后通过转染上调和下调MSC的miR-21表达,观察miR-21靶基因PTEN及信号通路分子PI3K/Akt、Bcl-2表达的改变,以及对MSC凋亡和增殖的影响,明确miR-21对ALI时MSC凋亡和增殖的调节及其作用机制;将转染后高表达miR-21的MSC注入LPS诱导的ALI小鼠体内,观察转染后的MSC在体内凋亡及增殖,miR-21靶基因及相关信号通路分子表达的改变,及修复肺损伤和保护肺功能的作用.结果 ALI组、MSC处理组的PTEN、PI3K、Akt、Bcl2基因和蛋白表达高于空白对照组,差异具有统计学意义(P<0.05);MSC处理组的PTEN、PI3K、Akt、Bcl2基因表达低于ALI组,差异具有统计学意义(P<0.05);LY294002处理的miR-21-MSC标记细胞、沉默PTEN的miR-21-MSC标记细胞的MSC存留率、MSC移植后细胞存活率高于miR-21-MSC、野生型MSC细胞,肺湿/干重比低于miR-21-MSC、野生型MSC细胞,差异具有统计学意义(P<0.05).结论 探讨ALI时调节MSC凋亡、增殖相关的miRNAs及其作用机制有助于为增加移植后的细胞存活率找到新的治疗靶点.