差速离心法提取血小板来源的外泌体及其鉴定

摘要

目的 探究影响血小板来源外泌体的提取与鉴定的因素.方法 该次于2020年6—9月期间,方便选取实验样本100份展开研究,采用差速离心法进行分离提取,采用透射电镜、Western Blotting验证提取产物;使用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定外秘体总蛋白浓度.结果 差速离心法可获得血小板源外泌体,存放3d的血小板源外泌体蛋白质的浓度为(1096.1±10.5)μg/mL,存放1 d的的血小板源外泌体蛋白质的浓度为(709.5±9.5)μg/mL,存放时间长的血小板来源外泌体的蛋白质浓度明显高于存放天数短的,差异有统计学意义(t=273.03,P<0.05).未冻存组蛋白浓度(1820.1±10.5)μg/mL明显高于不含DMSO冻存组(1155.3±2.5)μg/mL和含5％DMSO冻存组(1402.5±6.2)μg/mL,差异有统计学意义(t=615.930、342.470,P<0.05).结论 随着保存时间的增加,单采血小板来源外泌体的含量也在增加,冻存方式同样会对单采血小板来源外泌体的含量产生影响.