乙酰辅酶A含量对酿酒酵母乙酸乙酯合成的影响

摘要

通过缺失乙酰辅酶A水解酶(ACH)基因和过表达乙酰辅酶A合成酶(ACS)基因技术提高酿酒酵母合成乙酰辅酶A(acetyl-CoA)能力的同时,过表达醇酰基转移酶(ATF)基因,提高乙酸乙酯合成能力,并考察acetyl-CoA含量对酿酒酵母合成乙酸乙酯能力的影响.结果表明,敲除ACH1基因、且在敲除ACH1基因基础上过表达ACS1、ACS2基因均能提高酿酒酵母Acetyl-CoA含量,进而提高乙酸乙酯含量.较亲本菌株α5,缺失突变株α5AACH1、重组菌株α5-A1、α5-A2的Acetyl-CoA的含量均分别提高了52.5％、80.33％、52.79％,乙酸乙酯含量分别提高10.59％、26.12％、23.70％.在敲除ACH1基因、过表达ACS1和ACS2基因的基础上同时过表达ATF1基因,得到工程菌株A1-ATF1和A2-ATF1,较亲本菌株α5,乙酸乙酯含量分别提高226.09％、530.43％、289.57％,工程菌株A1-ATF1乙酸乙酯产量最高,为72.52 mg/L.研究表明,提高乙酰辅酶A含量能够促进乙酸乙酯的合成,为提高乙酸乙酯生成量提供了新思路.