鸭源绿色气球菌的分离鉴定及16S rRNA基因序列测定与遗传进化分析

摘要

【目的】研究河南某鸭场雏鸭发生急性死亡的致病菌及其系统发育地位。【方法】采集发病鸭场病死鸭肝脏、脾脏,进行细菌形态学观察、革兰氏染色、生化特性鉴定、16S rRNA基因的序列分析、药敏试验及致病性试验。【结果】分离菌在鲜血琼脂培养基上长出表面光滑,凸起,乳白色,呈α-溶血的革兰氏阳性球菌。生化试验结果表明,分离菌对麦芽糖、蔗糖、棉籽糖、硝酸盐还原反应、MP-VP试验、尿素、赖氨酸脱羧酶、鸟氨酸脱羧酶、七叶苷均为阳性,对木糖、乳糖、葡萄糖、山梨醇、硫化氢、枸橼酸盐、蛋白胨、甘露醇、苯丙氨酸、甲基红试验等均为阴性。16S rRNA基因测序及BLAST比对结果显示,分离菌16S rRNA基因序列与NCBI上已发布的绿色气球菌相似性性在94.8%~99.9%之间,其中与菌株Mnlv1、Mnlv2、W66等相似性最高,达99.9%;与菌株GXBL-1相似性最低,为94.8%。系统发育树分析表明,分离菌与绿色气球菌FL0915MS、Mnlv2等绿色气球菌在同一分支上,属于同一属群,其中与FL09亲缘关系最近。药敏试验结果显示,分离菌对磷霉素、氨苄西林、阿莫西林敏感;对青霉素、新生霉素、阿米卡星等中度敏感;对利福平、新霉素、杆菌肽、红霉素、恩诺沙星等耐药。致病性试验结果表明该菌具有致死性,并随着接种浓度增大而增强。【结论】本研究确定了河南某鸭场引起雏鸭急性死亡的病原菌是绿色气球菌,为该菌引起疾病的临床诊断和治疗提供了参考依据。