空肠弯曲菌对大环内酯类药物耐药性的产生、稳定及其分子机制

摘要

过去对空肠弯曲菌对大环内酯类药物耐药性的研究主要集中在不同来源或体外培养系的菌株方面。本研究用来自同一母系菌株的红霉素耐药(Ery(r))变异菌株同时进行体外和体内试验来研究空肠弯曲菌对大环内酯类药物耐药性的产生、稳定及遗传基础。给15日龄鸡接种低剂量Ery(r)变异菌株(MIC=32或64μg/mL),然后持续暴露在低剂量泰勒菌素下,但没有出现耐更高剂量的Ery(r)变异菌株(MIC>512μg/mL)。在缺乏大环内酯类药物选择压力的情况下,低剂量的红霉素耐药性在体内或体外都不稳定。但是,高剂量的红霉素耐药性在体内和体外都表现出显著的稳定性。69株被选Ery(r)变异菌株的核糖体序列分析表明特异性点突变(A2074G或者A2074C)在所有高耐药性Ery(r)变异菌株中都存在。在体外选择的Ery(r)变异菌株中没有观察到核糖体蛋白L4突变。但是,在体内选择的Ery(r)变异菌株中,在核糖体蛋白L4上发现了3种特异性突变:G74D、G57D、G57V。仅在体外选择菌株中发现了1株变异菌株,该变异菌株在核糖体蛋白L22的98位上插入了3个氨基酸,TSH。CmeABC外排泵的缺失显著降低了Ery(r)变异菌株的红霉素MIC值。结果表明,鸡中高度耐药性Ery(r)弯曲菌的出现是由多因素造成的,揭示了空肠弯曲菌大环内酯类耐药性的耐药剂量依赖的稳定性,也揭示了空肠弯曲菌在体内和体外利用外排泵及不同机制产生红霉素耐药性。