长毛兔和獭兔白细胞介素-4基因的序列分析与真核表达

摘要

应用反转录 - 聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,在国内首次从ConA诱导培养的长毛兔和獭兔外周血淋巴细胞总RNA中扩增出,IL-4基因.将扩增基因克隆人pMD18-T载体,经序列测定分析表明,长毛兔和獭兔IL-4基因全长均为441bp,两序列间碱基组成无差异(登录号:EF606761和EU639687).长毛兔和獭兔IL-4基因编码147个氨基酸,其中前24个氨基酸组成信号肽,余下的123个氨基酸组成成熟肽.与已报道的犬、猫、人、猪、牛、羊、马、大熊猫和鼠的IL-4核苷酸同源性分别为61.8%、63.4%、69.8%、65.1%、64.1%、64.1%、63.1%、57.0%、60.5%,推导的氨基酸同源性分别为47.2%、50.0%、53.6%、52.1%、48.3%、46.9%、52.1%、43.7%、43.0%.将测序正确的阳性质粒采用脂质体法转染COS-7,用RT-PCR鉴定转染细胞中IL-4基因的表达,并通过MTT法检测到表达的IL-4蛋白具有一定的生物学活性.