化学修饰法制备B组轮状病毒生物素核酸探针及应用研究

摘要

用亚硫酸氢钠－乙二胺溶液对Ｂ组轮状病毒的ｓｓＲＮＡ胞嘧啶修饰和转氨基作用，与生物素ｅ－氨基己酸Ｎ－羟基琥珀酰亚胺酯反应，制备探针与样品在硝酸纤维膜上的进行点杂交，经亲合素－碱性磷酸酶系统显色，可测出１０６．２５－２１２．５ｐｇ的ＲＮＡ靶序列，特异性试验表明，Ｂ组生物素探针只能与Ｂ组核酸杂交；而与无关核酸无杂交信号，用Ｂ组探针检测４５份仔猪腹泻粪样，检出Ｂ组阳性５份，检出率１１．１％，明显高于ＰＡＧ