两株不同亚型禽流感病毒NS1基因的表达及抗原性检测

摘要

为进一步研究禽流感病毒非结构蛋白NS1的功能及其在临床中的应用,本试验分别对H5N1、H9N2两株不同亚型禽流感病毒的NS1基因进行了原核表达及抗原性检测.实验分别用限制性内切酶EcoRI和XhoI消化不同亚型NS1基因的重组质粒pMD-18T-NS1(H9N2)和pMD-18T-NS1(H5N1),获得目的片段NS1,然后将NS1基因克隆到原核表达载体pProEXHTc中.将重组质粒pProc-NS1(H9N2、H5N1)转化DH5α感受态细胞,用1mmol/L IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE检测,目的蛋白分子量大小为30ku,与预期结果相符.Western-blot检测表明所表达的蛋白能与NS1的多克隆抗血清反应,并且存在交叉反应.