高致病性猪蓝耳病免疫金标试纸条的研制与应用

摘要

本试验利用柠檬酸三钠还原法制备粒径约为40 nm的胶体金,在玻璃纤维和硝酸纤维素膜的检测线和质控线上分别喷上胶体金PRRSV多克隆抗体、HP-PRRSV单克隆抗体和羊抗鼠IgG二抗.本试验组装的免疫胶体金诊断试纸条具备良好的敏感性和较高的特异性,最低病毒检测限为100TCID50;只对高致病性猪蓝耳病呈阳性反应,对PRRSV (ATCC VR2332)有弱反应,对猪瘟病毒、猪传染性胃肠炎病毒、猪伪狂犬病毒、猪圆环病毒均无反应.重复性试验表明,所研制的试纸条结果重复性较强,4℃条件下至少可保存半年.应用该试纸条对60份临床样品检测,同时与高致病性蓝耳病RT—PCR诊断试剂盒的方法进行符合性比较验证,结果显示两种方法检测结果的符合率达91％ (10/11),证明本研究制备的高致病性猪蓝耳病抗原免疫金标试纸条是快速便捷的检测高致病性猪蓝耳病的新型检测技术.