胆固醇配基色谱在蛋白质复性中的应用

摘要

以三聚氯氰为连接臂,采用两步法将疏水配基胆固醇修饰到交联琼脂糖(Sepharose)介质上,构建了胆固醇配基色谱.以溶菌酶(Lys)为模型蛋白,考察了胆固醇配基色谱的复性效果,并研究了流速、上样质量浓度和上样量对色谱复性效果的影响,确定了溶菌酶复性的最佳方法.研究结果表明,当溶菌酶上样量为1.00 mL,介质含0.25 mg溶菌酶时,在0.02 mL/min操作流速下进行吸附-洗脱复性,其最终蛋白收率和活性收率分别为96.3%和91.4%,有效促进了溶菌酶的复性.