疏水相互作用

摘要： 中聚合度异麦芽/麦芽多糖(megalo isomalto/malto-polysaccharides,M-IMMPs)在不阻碍低溶解度的乙基红生物降解的前提下展现出了新颖的助溶效果,但是其聚合度低(11~12),助溶效果弱,限制了M-IMMPs的研究和应用。该研究通过控制直链糊精和麦芽糖配比合成了一系列具有梯度分子质量的M-IMMPs,通过全波长扫描、核磁共振光谱、扫描电镜和傅里叶红外光谱对其乙基红助溶效果和复合物进行表征。结果表明,M-IMMPs分子质量越大,助溶效果越好,可使乙基红溶解度提高至4.5倍,且助溶效果并不仅来源于高分子质量和α1→6键含量。乙基红质子化学位移表明,疏水相互作用贡献了助溶效果。扫描电镜展示了原颗粒从片块、菱状向糊状的转变,红外光谱表明了存在氢键的可能。由于疏水相互作用的非特异性,M-IMMPs在其他偶氮染料中具有助溶应用潜力。

摘要： 为提高有益的生物活性疏水小分子的生物利用度,采用纳米液滴控制法制备对疏水性物质姜黄素具有良好吸附性能的淀粉纳米粒子,姜黄素在淀粉纳米颗粒的糊化-老化过程中被负载形成以淀粉纳米粒为外壳的微胶囊形式的核壳结构。通过微观结构、X射线衍射和傅里叶变换红外光谱探讨了淀粉纳米粒子和姜黄素的结合方式,并应用于食品包装材料。结果表明:淀粉纳米颗粒的平均粒径为(200±40) nm,呈圆形或椭圆形,复合物属于V形结晶构型,姜黄素与淀粉纳米粒子的络合方式是通过氢键和疏水相互作用。淀粉纳米粒子对姜黄素的负载率达到75.5 mg/g, DPPH自由基清除率达到59.3%。淀粉纳米粒子具有良好的生物相容性,不仅提高了姜黄素的稳定性,而且有利于人体的吸收和利用,负载姜黄素后添加到薄膜材料中其具有作为抗氧化包装的潜力。

摘要： 通过调节pH值(4、5、6、7、8、9)改变鱼明胶-果胶复合凝胶体系的非共价相互作用状态,研究氢键、疏水相互作用和静电排斥作用对鱼明胶-果胶复合胶体凝胶特性的影响.结果 表明,鱼明胶-果胶在pH 5时形成超大分子的复合聚集体,疏水相互作用最强,且复合体之间也具有强烈的静电引力.鱼明胶-果胶在pH 7时氢键较强.鱼明胶-果胶在pH 9时静电斥力最强.以疏水相互作用主导的复合胶体稳定性较差,但鱼明胶-果胶复合胶体的胶融温度和凝胶温度均较高;而以静电排斥主导的复合胶体具有较高的凝胶强度和稳定性;以氢键主导的复合胶体具有更强的凝胶网络结构,体系更加稳定.因此,不同的非共价相互作用对鱼明胶-果胶复合胶体的性质作用不同,这对建立蛋白质-多糖复合凝胶体系目标性质具有基础作用.

摘要： [目的]探讨十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulfate,SDS)对低盐条件下肌球蛋白热聚集的抑制效果及机理.[方法]提取罗非鱼(Oreochromis niloticus)肌球蛋白,比较精氨酸、蔗糖和SDS对肌球蛋白热聚集的抑制效果,确定添加3 mmol/L的SDS,进一步分析0～150 mmol/L KCl的低盐条件下,热处理(50°C,30 min)对肌球蛋白体系浊度、溶解度、分子结构及粒度分布的影响.[结果]在实验盐浓度范围内,肌球蛋白溶解性差,体系浑浊,经热处理后溶解度明显下降(P<0.05),表面疏水性增大,α-螺旋含量减小(P<0.05),肌球蛋白分子热变性聚集明显;添加SDS后,表面疏水性增大(P<0.05),微量SDS与肌球蛋白产生特异性结合,导致纤丝解离,分子间静电斥力增加,平均粒径减小(P<0.05),在1～100 mmol/L KCl范围内溶解度明显增大(P<0.05),SDS对肌球蛋白的增溶效果明显;SDS-肌球蛋白亲水复合体经热处理后分子进一步展开,表面疏水性明显增大(P<0.05),体系仍然澄清透明,分子间无明显的热聚集.[结论]SDS可抑制肌球蛋白的热聚集,其抑制机理与低离子强度下SDS与蛋白分子间通过静电和疏水相互作用结合导致肌球蛋白纤丝解离有关.

摘要： Lum,Chandler和Week三人建立起来的尺度依赖的疏水相互作用理论为人们提供了一个重要的理论框架(LCW理论)去理解和进一步研究与疏水相互作用相关的现象。按照LCW理论,当一个疏水粒子的半径小于1纳米,它的疏水水合自由能与其半径的三次方成线性关系;而当一个疏水粒子的半径大于1纳米,它的疏水水合自由能与其半径的二次方成线性关系。1纳米是一个较为普适的转变半径。小于这个尺度,水合的热力学过程是由熵主导的,大于这个尺度,水合的热力学过程是由焓主导的。在这篇综述里,我们介绍了温度,压强和水里面的添加物对疏水水合自由能的影响。在实验上,我们对基于原子力显微镜的单分子力谱方法研究疏水高分子水合能作了重点介绍。同时,对这一理论在蛋白质折叠和膜组装等体系中的应用也做了介绍。

摘要： 以鸡肉肌原纤维蛋白(myofibrillar protein,MP)作为研究对象,利用脂肪氧化酶-亚油酸体系研究了蛋白质氧化对MP加热过程中的流变性质、凝胶状态下的二级结构和疏水相互作用的影响,并探讨了加热过程中的流变性质、凝胶状态下蛋白质的二级结构与疏水相互作用的内在联系.研究表明,与其他亚油酸浓度处理的样品相比,亚油酸浓度为2 mmol/L的MP样品的G'值(＞68°C)最大.随着亚油酸的加入,α-螺旋含量从未氧化时的48.31％一直降低到亚油酸10 mmol/L时的最低值29.57％,而β-折叠含量则从14.75％缓慢升高到22.14％,β-转角含量也随着氧化程度的升高,从16.28％增加到21.88％,无规则卷曲的含量总体呈现升高的趋势.随着氧化程度的升高,MP凝胶的疏水相互作用先增加后降低,在2 mmol/L达到最大值,同时G'值(＞68°C)在2mmol/L时达到最大,这表明疏水相互作用的变化与MP凝胶中蛋白质二级结构的变化具有密切的相关性.

摘要： 生物解离形成的乳状液是限制生物解离技术普及的重要瓶颈,本研究以大豆生物解离过程中形成的乳状液为研究对象,利用动态光散射技术、激光扫描共聚焦显微镜分别表征不同酶解时间(1、2、3h)下乳状液粒径分布和乳状液内油脂与蛋白的空间分布,利用拉曼光谱从发色基团、二硫键及油脂-蛋白疏水相互作用角度重点解析乳状液中蛋白质荧光强度减弱机理.结果表明:生物解离使乳状液蛋白被酶解成小分子肽,从油滴表面脱落,导致油滴聚集合并.随着酶解时间延长,乳状液粒径变大,油滴数量减少,呈现出不规则形状;同时,激光扫描共聚焦显微镜结果显示随着酶解时间延长荧光强度减弱;拉曼光谱中与相同酶解时间条件下大豆分离蛋白比较,乳状液发色基团的强度明显减弱,且随着酶解时间延长强度减弱,说明乳状液中油脂-蛋白疏水相互作用屏蔽了分子内部的疏水性基团,使发色基团被掩盖,导致乳状液中荧光强度减弱.%Emulsion formation during enzyme-assisted aqueous extraction of soybean oil is an important bottleneck restricting the popularization of enzyme-assisted aqueous extraction.The particle size distribution and spatial distribution of lipids and proteins in emulsions obtained after different times (1,2,3 h) of enzymatic hydrolysis of soybeans were characterized by dynamic light scattering and laser scanning confocal microscopy.The mechanism for the attenuation of fluorescence intensity in emulsions was analyzed by Raman spectroscopy based on hydrophobic interaction of chromophores,disulfide bonds and oil-protein interactions.The results showed that enzymatic hydrolysis resulted in the cleavage of proteins in emulsions into small peptides,which fell off from the surface of the oil droplets,leading to the aggregation of the oil droplets.The particle size increased with extended hydrolysis time,and the number of oil droplets decreased correspondingly,becoming irregular in shape.Laser scanning confocal microscopy showed that the fluorescence intensity was attenuated with increasing hydrolysis time.The Raman spectral intensity of chromophores from the emulsion resulting from enzymatic hydrolysis of whole soybean flour was dramatically reduced as compared with that from soybean protein isolate (SPI) at the same hydrolysis time and it decreased with the increase in hydrolysis time.These findings led us to conclude that hydrophobic oil-protein interaction in emulsions shielded the intermolecular hydrophobic groups and masked the chromophores,thus resulting in a reduction of fluorescence intensity.

摘要： 适用于HPLC-SEC分析的超纯水高效液相色谱（HPLC）是一种进行物质分离、鉴定和定量的分析方法。与其它通常采用梯度模式的各种生物聚合物HPLC（离子交换、疏水相互作用和反相色谱）不同，SEC（尺寸排阻色谱法）通常采用等度方法。

摘要： 本文采用人工唾液模拟人体口腔唾液,研究亲水亲油平衡(HLB)值依次递减的四种非离子型表面活性剂山梨醇酐月桂酸酯(Span-20)、山梨糖醇酐单棕榈酸酯(Span-40)、山梨醇酐单硬脂酸酯(Span-60)和山梨醇酐单油酸酯(Span-80)在口腔消化中与粘蛋白的相互作用.浊度、颗粒水合粒径与原子力显微镜测定结果表明,Span-20、Span-40和Span-60与粘蛋白的相互作用强度与其HLB值呈负相关关系;而Span-80的添加,对粘蛋白颗粒粒径影响不大,并有使其变小的趋势,导致粘蛋白结构变得更加紧凑、无规则.内聚力的测定结果表明,所用非离子型表面活性剂与粘蛋白之间的相互作用为非共价作用力,主要依赖于疏水相互作用与氢键.本研究结果对食品工业开发新型的口感良好并有利健康的饮料具有一定的指导意义.

摘要： The effect and regulatory mechanism of urea on the properties and non-covalent intermolecular forces of heat-induced myofibrillar protein gel were studied.The relationship between intermolecular forces and gel properties was explored.This study discussed whether urea addition is a scientific method for studying gel hydrogen bonding and hydrophobic interaction.Heat-induced myofibrillar protein gels containing 0.0-0.4 mol/L urea were prepared.The electrostatic interaction was measured using a zeta potential analyzer.The hydrophobic interaction and hydrogen bonding were measured using a Raman spectrometer.The water-holding capacity,hardness and springiness of the gels were measured by a centrifugation method and a texture analyzer.As urea concentration increased,the absolute value of zeta potential of the gels decreased from 7.83 to 5.55 mV,and the surface hydrophobicity (S0-ANS) of myofibrillar protein increased from 698.5 to 885.3.The I760 cm-1/I1003 cm-1 ratio (normalized intensity) decreased from 0.957 1 to 0.849 3,while the I850 cm-1/I830 cm-1 ratio declined first and then increased.The water-holding capacity,hardness and springiness exhibited a declining trend.Correlation analysis showed that electrostatic interaction,surface hydrophobicity and hydrophobic interaction had a significant effect on water-holding capacity and texture characteristics of heat-induced protein gel.%研究尿素对肌原纤维蛋白凝胶非共价键作用力和特性的影响及其调控机制,揭示凝胶作用力和特性之间的关系,并探讨通过添加尿素研究凝胶氢键和疏水作用方法的科学性.分别用0.0～0.4 mol/L尿素处理肌原纤维蛋白并加热制成凝胶,用Zeta电位仪测定其静电相互作用;利用拉曼光谱仪测定其疏水相互作用与氢键;用离心法和质构仪测定相应尿素浓度条件下热诱导凝胶的保水性、硬度和弹性.结果表明,随着尿素浓度增大,热诱导凝胶的Zeta电位绝对值由7.83 mV下降到5.55 mV;S0-ANS从698.5逐渐增大到885.3;I760cm-1/I1 003cm-1由0.957 1降到0.849 3;T850cm-1/I830cm-1先下降后上升;随着尿素浓度增大,凝胶保水性、硬度和弹性都存在下降的现象.相关性分析表明静电相互作用、表面疏水性和疏水相互作用显著影响肌原纤维蛋白热诱导凝胶保水性和质构特性.

摘要： 在以壳聚糖为基质制备温敏性水凝胶的研究中发现,用β-甘油磷酸盐作为缓冲介质将壳聚糖溶液的pH调至生理pH(～7.2)后,可使该混合溶液在室温下(25°C)保持为溶液体系而不会立即形成凝胶状沉淀,而随后加热溶液可形成均匀的水凝胶.甘油磷酸盐这种特殊碱性盐的加入提供了恰当的缓冲条件和其它物理化学环境,包括疏水相互作用和氢键形成的控制,这对于中性pH的壳聚糖溶液在室温时保持为溶液状态,而当加热至37°C形成凝胶是必需的.壳聚糖溶液pH值是溶液中壳聚糖分子链上电荷分布状态的综合反映,而影响pH的因素有壳聚糖的脱乙酰度(DDA),用于溶解壳聚糖的酸的种类,以及加入β-甘油磷酸盐(β-GP)的量,这种溶液转变为水凝胶的相转变是一个吸热过程,因此加热温度在很大程度上也影响了水凝胶的形成过程.本实验制备了温敏性壳聚糖/β-甘油磷酸盐水凝胶,并探讨了这些关键因素对体系凝胶化过程的影响。

摘要： 本发明提供了一种蛋白或抗体，其中，在选自所述蛋白的疏水性相互作用位点内的一对疏水性氨基酸之中，一个疏水性氨基酸转化成带有正电荷的物质，而另一个疏水性氨基酸转化成带有负电荷的物质，并且借助所述正电荷和所述负电荷而在所述蛋白的所述疏水性相互作用位点内引入静电相互作用。本发明还提供了一种制备所述蛋白或抗体的方法，以及一种使用所述抗体测量重链与轻链之间的偶合程度的方法。根据本发明的所述蛋白或抗体受到同源二聚体或单体的污染较低，并因此能以高纯度得到异源二聚体。

摘要： 本发明提供了一种蛋白或抗体，其中，在选自所述蛋白的疏水性相互作用位点内的一对疏水性氨基酸之中，一个疏水性氨基酸转化成带有正电荷的物质，而另一个疏水性氨基酸转化成带有负电荷的物质，并且借助所述正电荷和所述负电荷而在所述蛋白的所述疏水性相互作用位点内引入静电相互作用。本发明还提供了一种制备所述蛋白或抗体的方法，以及一种使用所述抗体测量重链与轻链之间的偶合程度的方法。根据本发明的所述蛋白或抗体受到同源二聚体或单体的污染较低，并因此能以高纯度得到异源二聚体。

摘要： 本发明涉及一种分离细胞外囊泡的方法，具体涉及一种利用细胞外囊泡的疏水性分离细胞外囊泡的方法，以及使用所述方法分离的细胞外囊泡。当使用所述方法时，本发明所述分离细胞外囊泡的方法能够从包括血液和尿液的各种动物体液或包括癌症组织在内的各种组织中分离出不含用常规方法难以消除的脂蛋白污染的细胞外囊泡。所述方法可以解决脂蛋白污染引起的常规问题，并且有望成为一项重要的技术，对使用从各种动物体液或组织中分离的细胞外囊泡的各种研究产生重大影响，如特征和功能研究、多组学研究、新型生物标志物的挖掘、诊断和治疗等。

摘要： 一种基于疏水相互作用构筑蛋白质/磷脂/胆固醇多元杂合微尺度囊泡的方法。本发明属于囊泡模型制备技术领域，具体涉及一种基于疏水相互作用构筑蛋白质/磷脂/胆固醇多元杂合微尺度囊泡的方法。本发明是为了解决现有单一组分囊泡存在的不足，如磷脂囊泡稳定性差，聚合物囊泡渗透性差，其膜几乎没有流动性，蛋白质囊泡渗透性较高而流动性较差的问题。方法：1、首先将Chol‑COOH接枝到BSA‑NH2表面；2、将BSA‑NH2与PNIPAM耦合得到BSA‑Chol/PNIPAM；3、构筑蛋白质囊泡；4.基于疏水相互作用将磷脂与蛋白质囊泡共组装成多元杂合囊泡。本发明以天然细胞膜的主要成分为基元构建的多元杂合微尺度囊泡。

摘要： 本发明涉及一种使用疏水相互作用色谱法纯化寡核苷酸的方法。

摘要： 本发明公开一种以卞胺为配基的高效疏水相互作用色谱介质，其结构式为：；本发明还公开所述高效疏水相互作用色谱介质的制备方法，包括以下步骤：（1）硅胶活化；（2）制备环氧化硅胶；（3）环氧开环制备高效疏水相互作用色谱介质；同时，本发明还公开将所述高效疏水相互作用色谱介质应用于高效液相色谱中来分离制备天然蛋白卵清蛋白和细胞色素C的应用，回收简单，收回率高，制备的卵清蛋白、细胞色素C纯度高。

摘要： 本发明公开一种以卞胺为配基的高效疏水相互作用色谱介质，其结构式为：；本发明还公开所述高效疏水相互作用色谱介质的制备方法，包括以下步骤：（1）硅胶活化；（2）制备环氧化硅胶；（3）环氧开环制备高效疏水相互作用色谱介质；同时，本发明还公开将所述高效疏水相互作用色谱介质在重组链霉亲和素的复性和纯化的应用，复性效率高，活性回收率高，复性后重组链霉亲和素的纯度高。

摘要： 本申请提供了一种用于表征和/或确定疏水相互作用色谱(HIC)的病毒清除能力的方法，其包括HIC的病毒清除的多变量分析的实验设计。所述方法通过运行D‑最优实验设计提供了对使用HIC进行的所述病毒清除的机制的理解，所述D‑最优实验设计包括对多种因子的评价，如pH、缓冲液浓度、柱加载浓度、柱流速或所述HIC柱的疏水强度。

摘要： 本发明提供了用于表征肽或蛋白质的快速、灵敏的高通量方法和系统，其使用疏水相互作用色谱‑联用的天然质谱来改进生物制药产品的制造工艺，如在抗体纯化期间鉴定杂质，在生产期间监测翻译后修饰变体，或表征抗体‑药物缀合物的药物与抗体的比率。生成肽或蛋白质的分离概况并进行比较，以鉴定或定量肽或蛋白质。

摘要： 本发明涉及通过疏水相互作用色谱，将多特异性CrossMab抗体与其轻链错配变体在包含CrossMab双特异性抗体及其错配的抗体变体的溶液中分离的方法。