应用穿梭质粒建立哺乳动物细胞诱变检测系统的实验研究

摘要

本文通过用已知诱变剂EMS对基于EB_2病毒的穿梭载体pMCi5在小鼠3T3细胞中的诱变作用的研究,初步建立了一种能在DNA水平研究哺乳动物细胞诱变作用的快速实验系统。pMCi5质粒带有细菌lacI基因,可作为体细胞诱变研究的靶基因,最后通过转化大肠杆菌,在含X-gal的培养基中快速检测lacI突变。该系统的自发突变率小于1.21×10^(-4),300μ/mlEMS的诱发突变率为3.8×10^(-3)。经酶谱分析得到的7个突变子,在DNA水平上没有大的改变,EcoRl酶切位点上无点突变发生。