AMPK在维生素E琥珀酸酯诱导人胃癌细胞自噬中的作用研究

摘要

目的:研究维生素E琥珀酸酯(VES)是否影响人胃癌SGC-7901细胞中腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)活性,并探讨AMPK在VES诱导自噬中的作用。方法:用不同剂量(5、10、15、20μg/m L)VES处理SGC-7901细胞24 h,以及20μg/m L VES分别处理SGC-7901细胞3、6、12、24 h后,Western blot法检测SGC-7901细胞中自噬标志蛋白LC3、Beclin-1及AMPK、ACC及其磷酸化蛋白的表达。用RNAi技术沉默AMPK,20μg/m LVES处理SGC-7901细胞24 h,Western blot法检测LC3、Beclin-1蛋白以及AMPK、m TOR、p70S6K与4EBP-1及其磷酸化蛋白表达,并采用荧光定量PCR法检测LC3 m RNA表达情况。结果:VES处理SGC-7901细胞后,与对照组比较,随着VES剂量的增加、作用时间的增长,AMPK磷酸化水平上升,LC3、Beclin-1蛋白表达增加(P<0.05)。RNAi沉默AMPK后,与单纯VES处理组比较,LC3、Beclin-1蛋白表达降低,LC3 m RNA表达下降(P<0.05);m TOR、p70S6K及4EBP-1磷酸化活性升高(P<0.05)。结论:VES可诱导SGC-7901细胞中AMPK活化,AMPK活化后影响m TOR及其下游分子活性,继而诱导自噬的发生。