电穿孔法转染293T细胞条件的优化

摘要

为筛选电穿孔转染人胚肾293T细胞的最优条件,将增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因克隆至启动子pCMV前,获得的重组质粒在不同电压、质粒浓度和电击次数条件下电穿孔转染293T细胞,继而在倒置荧光显微镜下观察转染细胞,根据EGFP表达情况评价转染效率.结果表明400 V电压、45 mg质粒电穿孔转染293T细胞2次时转染效率达到44％,与脂质体转染效率(51％)无统计学差异.