酿酒酵母TAP42基因在细胞壁应激反应中的作用

摘要

研究蛋白质磷酸酶2A调节亚单位Tap42p(type 2A associated protein-42kD)在酵母细胞壁应激反应中的作用.采用一步基因置换法构建TAP42基因缺失(tap42Δ)酵母菌株;观察在细胞壁应激反应条件下tap42Δ菌株的克隆形成能力;通过全自动生长曲线分析仪检测细胞分裂增殖活力;RT-PCR检测细胞壁应激反应通路中转录因子Swi4p、Swi6p、Ssd1p和Mpt5p的表达水平.在正常培养条件下,与野生型酵母细胞(BY4743)比较,tap42Δ菌株形成较小克隆,细胞增殖活力较差;在细胞壁应激反应条件下,tap42Δ菌株的克隆大小和增殖活力都与BY4743菌株相似,菌株对应激反应诱导剂有一定的抗性;且缺失TAP42基因上调SWI4、SWI6、SSD1和MPT5等基因的转录表达水平.因此,缺失TAP42基因影响酵母细胞的分裂增殖能力,增强对细胞壁应激反应的抵抗性,上调细胞壁应激反应通路中转录因子的表达水平.