解木聚糖类芽孢杆菌木葡聚糖酶的分离纯化及学性质研究

摘要

解木聚糖类芽孢杆菌(Paenibacillus xylanilyticus)发酵液经硫酸铵分级沉淀、HiPrep26/10 Desalting柱脱盐、HiPrepDEAE FF16/10阴离子交换柱、HiPrep 16/60 Sephacryl S-100凝胶柱、HiPrep 16/10 Source 30S阳离子交换柱等,最终纯化出单一组分的木葡聚糖酶,经过SDS-PAGE电泳分析,此木葡聚糖酶相对分子量约为39 kD.该菌所产木葡聚糖酶的最适反应温度是50℃,在60℃以下较稳定；最适反应pH是7.0,在pH5.0-10.0范围内酶活力较为稳定.酶的动力学研究显示Km为65g/L,Vmax 为6.49 μmol/min,Kcat=10.86 s-1.底物特异性研究表明对木葡聚糖具有较高比活力.酶蛋白经质谱分析,比对结果显示与来源于Paenibacillus pabuli的木葡聚糖酶有较高同源性.本研究为首次报道解木聚糖类芽孢杆菌(P.xylanilyticus)产木萄聚糖酶.