核酸免疫制备鼠抗棉铃虫FK506结合蛋白的多克隆抗体

摘要

利用电注射基因导入法制备小鼠抗棉铃虫FK506结合蛋白(FKBP12)的多克隆抗体,并通过Western blot验证抗体与抗原的特异性结合.构建重组质粒pcDNA3-FKBP12并测序验证序列的正确性,利用基因导入法将重组质粒pcDNA3-FKBP12注射到小鼠体内,免疫4次后用ELISA检测法确定抗体的效价,并对抗体的特异性结合进行Western blot以及免疫组化检测.结果表明,小鼠抗FK506结合蛋白血清的效价达到1:25600,Western blot结果显示此抗血清能与融合蛋白His-FKBP12结合,免疫组化结果表明在棉铃虫3龄幼虫不同组织中FKBP12均有表达.说明电注射基因导入法制备的小鼠抗FK506结合蛋白的抗体在滴度和特异性结合方面都达到预期要求.