利用CRISPR/Cas系统对血友病B小鼠进行基因纠正的初步探索

摘要

血友病B是人类常见的X染色体遗传的隐性遗传疾病,目前对于遗传疾病的治疗还没有很好的办法,通过基因治疗可以实现对遗传病的彻底治愈.本研究利用高效基因编辑技术CRISPR/Cas系统,对血友病B小鼠尝试基因修复进行初步的探索,将突变的凝血因子IX（Factor IX, FIX）基因进行同源替换,修复为正常序列.本研究中将同一种纯合突变类型的小鼠交配之后得到的受精卵,进行细胞核显微注射.对收集到的8枚囊胚的基因组中的靶位点,进行巢氏PCR扩增,直接进行测序检测基因型序列.检测结果为4枚囊胚的基因被成功编辑,其中3枚囊胚为靶序列的基因敲除突变,而有1枚囊胚成功进行同源重组,实现基因纠正.