发酵条件对天冬氨酸转氨酶重组菌高效表达与质粒稳定性的影响

摘要

通过对以pET-22b质粒为载体,大肠杆菌BL21为宿主构建的产天冬氨酸转氨酶的重组菌BL21/pET-aspC,质粒稳定性与重组菌产酶活性的发酵条件优化,对比了不同发酵条件对基因工程菌菌体生长、质粒稳定性和转氨酶酶活性的影响,得到较工程菌常用LB培养基更利于工程菌生长的培养基CSN。考察了该培养基主要成份玉米浆、酵母粉和柠檬酸钠对重组菌生长及质粒稳定性的影响。优化后,该发酵体系的发酵成本为LB培养基的10%,外源基因的质粒稳定性得到明显改善,重组菌生物量与天冬氨酸转氨酶活性显著提高。优化后培养体系成本低廉,发酵稳定,适于基因工程菌的大规模工业化生产发酵使用。