大鼠脑缺血-再灌注后G蛋白偶联受体84的表达升高

摘要

目的 探讨G蛋白偶联受体84(GPR84)在大鼠脑缺-再灌注(I/R)后的表达及其功能.方法 构建大鼠大脑中动脉阻断(MCAO)模型,将大鼠分为假手术组(sham)和脑缺血2 h后再灌注12 h组(I/R 12 h)、24 h组(I/R 24 h)、48 h组(I/R 48 h)、72 h组(I/R 72 h);体外培养大鼠原代皮质神经元,将细胞分成对照组(control)、氧糖剥夺1 h复氧复糖24 h组(OGD/R 1 h)和氧糖剥夺2 h复氧复糖24 h组(OGD/R 2 h);GPR84小干扰RNA(siRNA)转染神经元,将细胞分为对照组(control)、氧糖剥夺1 h复氧复糖24 h组(OGD/R 1 h)、神经元转染干扰对照后氧糖剥夺1 h复氧复糖24 h组(NC+OGD/R 1 h)和神经元转染GPR84 siRNA后氧糖剥夺1 h复氧复糖24 h组(GPR84 siRNA+OGD/R 1 h);Western blot检测GPR84的表达;免疫荧光检测脑组织中GPR84蛋白的定位;DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)检测神经元的凋亡比例.结果 与假手术组相比,大鼠脑I/R后各时间点GPR84蛋白水平明显升高(P<0.01).GPR84主要定位于神经元和小胶质细胞,星形胶质细胞几乎不表达,并且神经元中GPR84的表达在脑I/R后明显提高.与对照组相比,OGD/R 1 h和OGD/R 2 h组神经元中GPR84蛋白的表达均明显提高(P<0.01),并且GPR84干扰可以明显抑制氧糖剥夺后复氧复糖诱导的GPR84表达上调.与对照组相比,OGD/R组神经元凋亡明显提高(P<0.01);与NC+OGD/R 1 h组相比,GPR84 siRNA+OGD/R 1 h组神经元凋亡明显减少.结论 脑I/R诱导的GPR84表达升高在脑缺血性损伤中发挥着重要作用.