粘着斑激酶反义寡核苷酸对平滑肌细胞粘附迁移和凋亡的影响

摘要

为研究粘着斑激酶反义寡核苷酸对平滑肌细胞粘附迁移和凋亡的调控作用,采用纤粘连蛋白(fibronectin,FN)诱导平滑肌细胞(smooth muscle cells,SMCs)粘附迁移并活化粘着斑激酶(focal adhesion kinase, FAK),将FAK反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotides, ODNs)经脂质体转染细胞,观察对FAK磷酸化、细胞粘附迁移以及凋亡的影响.结果表明,FN在有效地诱导SMCs粘附迁移并活化FAK的同时,凋亡细胞数显著低于对照,(8.96±1.2)%和(23.45±9.6)%.脂质体可有效地介导ODNs转染,转染效率为(86.7±4.5)%,FAK磷酸化表达量明显减少,不同浓度FN组5～60mg/L,细胞铺展率减少17.89%～27.67%,10、20、40和60mg/L FN组迁移细胞数也分别显著减少23.26%、21.63%、19.31%、17.88%,凋亡细胞数比对照高33.57%(P＜0.05),也显著高于FN组.据此可以认为FAK活化及其介导的信号转导通路是细胞外基质诱导SMC粘附迁移并抑制其凋亡的重要因素.反义FAK ODNs可有效地对此进行调控.