人类端粒酶逆转录酶基因转染对足叶乙甙诱导Raji细胞凋亡的影响

摘要

探讨人类端粒酶逆转录酶(hTERT)基因转入Raji细胞后足叶乙甙(VP-16)对细胞凋亡的影响.采用脂质体介导的转染方法将重组的hTERT基因转入Raji细胞,G418筛选;采用间接免疫荧光标记法及端粒酶聚合酶链反应-酶联免疫测定法检测hTERT蛋白表达水平和端粒酶活性的变化;姬姆萨染色及流式细胞仪观测细胞凋亡.结果发现:转染hTERT入 Raji细胞后,其表达hTERT的蛋白及端粒酶活性显著增加(P＜0.05).10μmol/L VP-16作用转染hTERT的Raji细胞48h、72h对细胞生长抑制作用不如转染空载体组及未转染组明显(P＜0.05).10μmol/L VP-16作用转染hTERT的Raji细胞72h,光镜下仅可见到很少量的细胞出现凋亡,流式细胞仪测定的细胞凋亡率(4.34±1.03)%显著降低,分别与转染空载体组(33.21±3.12)%及未转染组(31.63±3.06)%比较,P＜0.05.表明端粒酶活性过表达可使Raji细胞对VP-16产生抗凋亡作用.