MiR-138对MCF-7细胞端粒酶活性及端粒稳定性的调控作用

摘要

目的 研究MiR-138通过人端粒酶反转录酶(hTERT)作为下游靶基因,对人乳腺癌MCF-7细胞端粒酶活性的调控作用及端粒稳定性的影响.方法 在人乳腺癌MCF-7细胞中瞬时转染MiR-138模拟物,用MTT法检测细胞增殖活性,并于转染后48 h用实时定量RT-PCR检测端粒酶催化亚单位hTERT表达、TRAP assay检测端粒酶活性,同时对细胞进行53BP1抗体免疫荧光染色及端粒的FISH染色.结果 转染后48 h,MiR-138模拟物处理的MCF-7细胞hTERT表达水平比对照细胞降低2.18倍(2-△△Ct),端粒酶活性比对照细胞降低2.69倍,53BP1聚集形成的凝集点(Foci)部分与端粒位点重合,比率达到20.62%±1.55%.结论 MiR-138以hTERT作为下游靶分子调控MCF-7细胞端粒酶活性,影响细胞端粒稳定性.