神经节苷脂GD2可作为肺癌干细胞一个潜在的候选标志物

摘要

目的探索神经节苷脂GD2作为肺癌干细胞(LCSCs)标志物的可行性。方法用成球培养的方式在体外富集肺癌细胞系的肿瘤干细胞(CSCs);用实时定量PCR和蛋白质免疫印迹法检测LCSCs中干性相关基因以及GD3合成酶(GD3S)的表达;用流式细胞测量术检测肺腺癌细胞系A549中GD2及其他干性表型的表达;用CCK8法检测细胞增殖;用Transwell小室法和细胞划痕愈合实验检测细胞的体外侵袭和迁移;用肺癌移植瘤模型比较细胞系A549中不同亚群的致瘤性。结果体外成球培养能够成功富集到A549细胞的肿瘤干细胞,贴壁培养时,GD2+细胞的比例为0.57%,成球培养后GD2+细胞比例能够上升至20.4%。与GD2-A549细胞相比,GD2+A549细胞的体外增殖(P<0.05)、侵袭(P<0.05)和迁移能力(P<0.01)均显著提高。GD2与另外两种肺癌干细胞表型之间有密切联系,其表达水平与CD44(P<0.01)及EpCAM(P<0.001)的表达呈正相关。体内的结果表明,相比于GD2-A549细胞,接种GD2+A549细胞后肿瘤生长更快(P<0.001),恶性程度更高(P<0.01)。结论神经节苷脂GD2可作为LCSCs的潜在标志物以识别肿瘤干细胞,将GD2作为肺癌免疫治疗的靶点提供了新的思路。