磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯对L-02肝细胞氧化应激及凋亡损伤机制

摘要

在各类环境介质及生物体甚至人体中都检测到有机磷阻燃剂磷酸三(1,3-二氯-2-丙基)酯(tris(1,3-dichloro-2-propyl)phos-phate,TDCPP)的存在,为探究TDCPP对人体健康的毒性作用,选取人体正常肝细胞L-02细胞作为模型,考察在体外暴露条件下TDCPP对L-02细胞的细胞存活率、凋亡、氧化应激以及p53通路相关基因方面的影响.MTT结果显示,24 h、48 h、72 h的半数致死浓度(LC50)分别为:116.56μmol·L-1、81.89μmol·L-1、65.11μmol·L-1.TDCPP暴露24 h条件下,随着TDCPP暴露浓度的增加,细胞的凋亡率和活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平也逐渐增加,100μmol·L-1浓度条件下凋亡高达25.58％±1.61％,ROS水平是对照组的2.07±0.07倍.实时荧光定量PCR法检测线粒体凋亡通路相关基因的表达情况,在TDCPP刺激下,Bax、caspase-3、caspase-9、p53和Apaf-1相对表达量增加,Bcl-2相对表达量减少.蛋白免疫印迹法检测发现Bax/Bcl-2和caspase-3均随浓度增加而递增.本研究为综合评估TDCPP的生物和环境健康毒理效应提供了实验数据及理论支持.