环境浓度磷酸三(1，3-二氯-2-丙基)酯暴露对斑马鱼生长和生殖的影响

摘要

近年来，由于世界范围内对溴系阻燃剂的禁用，有机磷阻燃剂作为其替代品广泛地应用于建筑、纺织、化工、电子以及家装材料等行业。磷酸三（1，3-二氯-2-丙基）酯(TDCIPP)作为典型的有机磷阻燃剂，近些年来生产量及使用量都显著增加。由于该类阻燃剂通常是以物理添加方式添加到材料中，而非以较稳定的共价键作用，从而很容易释放到环境中。目前在世界各国饮用水、河流、生活污水中都可以检测到TDCIPP的存在，其浓度范围从几十到几千ng/L。然而目前有关TDCIPP的研究主要集中在高浓度的急性暴露实验所导致的各种毒性，这些实验所用浓度远远高于自然环境中存在的浓度。针对有机磷阻燃剂TDCIPP的使用可能对生态环境和人类健康带来的潜在危害，故本研究以斑马鱼为活体模型，进行毒理学实验。本研究使用环境浓度（50、500和5000 ng/L）的TDCIPP对斑马鱼进行长期暴露，通过研究下丘脑-垂体-甲状腺(HPT)轴、生长激素/胰岛素样生长因子(GH/IGF)轴和下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴的影响来综合评价其对斑马鱼生长和生殖的影响，主要研究结果如下:
　　1.环境浓度的TDCIPP暴露抑制了雌性斑马鱼的个体发育，降低了产卵量，然而没有改变斑马鱼HPG轴相关的基因表达、血浆中性激素的浓度和性腺组织学，因此证明环境浓度TDCIPP暴露所导致的生长迟缓和产卵量的降低不是通过干扰HPG轴引起的，本研究首次发现环境浓度TDCIPP暴露主要是通过干扰GH/IGF轴，导致个体发育受到抑制，进而影响产卵量，环境浓度TDCIPP暴露所引起的发育毒性比生殖毒性更加显著。
　　2.本研究首次将斑马鱼生长曲线用于毒理学暴露实验。通过建立斑马鱼生长曲线来确定取样时间点用以探究TDCIPP发育毒性的时间依赖性效应。环境浓度的TDCIPP暴露抑制了雌性斑马鱼的生长，改变了GH/IGF轴的基因表达，且具有时间依赖性，然而对HPT轴相关基因表达和甲状腺激素无影响，故GH/IGF轴可能是其发育毒性的主要靶点。

目录

声明

摘要

缩略语表

1．1 阻燃剂简介

1．2 环境中常见有机磷阻燃剂来源与分布

1．2．1 空气

1．2．2 水体

1．2．3 土壤

1．2．4 生物体

1．3 典型有机磷阻燃剂TDCIPP毒理学研究

1．4 鱼类内分泌系统

1．4．1 生长激素／胰岛素样生长因子(GH/GF)轴

1．4．2 下丘脑-垂体-甲状腺(HPT)轴

1．4．3 下丘脑-垂体-性腺(HPG)轴

1．5 斑马鱼简介

1．6 本研究的目的和意义

第二章 环境浓度TDCIPP慢性暴露对斑马鱼生殖的影响

2．1 前言

2．2 材料与方法

2．2．1 主要试剂

2．2．2 TDCIPP暴露溶液配制

2．2．3 斑马鱼的饲养及TDCIPP暴露

2．2．4 取样

2．2．5 水样和组织样中TDCIPP和BDCIPP的测定

2．2．6 斑马鱼性腺组织学切片制作

2．2．7 斑马鱼血浆中性激素含量的测定

2．2．8 基因表达

2．2．9 数据统计

2．3 结果

2．3．2 TDCIPP和BDCIPP在组织样中的浓度

2．3．3 累积产卵量

2．3．4 环境浓度TDCIPP暴露抑制雌性斑马鱼生长

2．3．5 环境浓度TDCIPP暴露对斑马鱼血浆性激素无影响

2．3．6 性腺组织学检查

2．3．7 环境浓度TDCIPP暴露对HPG轴基因表达无影响

2．3．8 环境浓度TDCIPP暴露改变了GH/IGF轴的基因表达

2．3．9 相关分析

2．4 讨论

第三章 环境浓度TDCIPP慢性暴露对斑马鱼生长发育的影响

3．1 前言

3．2 材料与方法

3．2．1 主要试剂

3．2．2 TDCIPP暴露溶液配制

3．2．3 斑马鱼的饲养、生长曲线及TDCIPP暴露

3．2．4 取样

3．2．5 斑马鱼血浆甲状腺激素含量的测定

3．2．6 基因表达

3．2．7 数据统计

3．3 结果

3．3．1 斑马鱼生长曲线

3．3．2 环境浓度TDCIPP暴露抑制雌性斑马鱼生长，并具有时间和剂量依赖性

3．3．3 环境浓度TDCIPP暴露改变GH／IGF轴基因表达，但不改变HPT轴基因表达

3．3．4 环境浓度TDCIPP暴露对斑马鱼血浆甲状腺激素无影响

3．4 讨论

4．1 全文总结

4．2 展望

参考文献

在校期间发表论文

致谢