洋葱表皮和小麦幼苗自发荧光的研究

摘要

自发荧光是多数植物组织具有的特征,这对于通过荧光标记手段研究基因表达非常不利,对自发荧光的认识有助于对其进行科学地应用。本研究选择常用的洋葱表皮细胞做参照,对比研究小麦的自发荧光现象,将小麦在有光照、无光照下幼苗不同发育天数的根、叶鞘、叶片制成装片,在激发光光源的作用下,观察小麦不同时期根、叶鞘、叶片的蓝色、绿色、红色自发荧光的分布情况;最后通过50 μg∙L−1的卡那霉素处理使小麦幼苗白化,制备叶片装片观察三种颜色的荧光。实验结果表明黄皮洋葱的内、外表皮细胞均检测不到红、绿、蓝色荧光;紫皮洋葱的表皮细胞色素会影响红色荧光的观察,也不具有荧光。在500 nm波长的激发光照射下,见光小麦的根在第1 d以及6~10 d具有红色荧光;叶片及叶鞘从第3 d起一直有强烈的红色荧光;黑暗培养的小麦根在第16 d出现红色荧光;叶鞘始终无荧光产生,叶片有较弱的红色荧光。450 nm激发光照射下,见光小麦,根在第1 d以及6~10 d有明显的绿色荧光;黑暗培养的小麦根从第16 d起出现绿色荧光。光照、黑暗下培养的小麦叶鞘都从第22 d起有明显的绿色荧光,两种条件下培养的小麦叶片始终检测不到绿色荧光;400 nm激发光照射下,小麦的根、叶鞘、叶片中蓝色荧光始终存在,且叶鞘中蓝色荧光随着发育天数增加逐渐强烈;处理后白化的叶片无法观察到红色和绿色荧光,蓝色荧光依然存在。白化处理后有利于通过红色荧光蛋白标记目的基因,为小麦的组织、细胞定位研究提供便利。