单子叶植物不同Ppc基因构建对烟草转化幼苗生长的影响

摘要

为比较单子叶植物2种不同形式(cDNA和DNA)的磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(phosphoenolpyruvate carboxylase.PEPC)基因(Ppc)对双子叶植物的转化效果,本研究将单子叶植物稗草(Echinochloa crusgalli)Ppc基因的cDNA和玉米(Zea mays)Ppc基因的DNA全长通过农杆菌介导对双子叶植物烟草(Nicotiana tabacum)进行了遗传转化;对转化叶盘和分化苗幼叶进行的GUS组织化学染色、PCR、RT-PCR检测结果证明,2种形式的Ppc基因均转入了烟草中;对分化幼苗进一步的培养观察结果发现:转Ppc基因cDNA的烟草分化苗生长发育正常,而转Ppc基因DNA的分化幼苗在培养过程中叶片白化现象严重,未完成正常生长发育过程,可能是由于完整基因DNA在异源细胞中在转录过程中发生了不正确的起始或错误的拼接,导致基因表达异常.由此推测遗传距离较大的物种间转移DNA基因序列全长可能会降低正常表达率,而转稗草Ppc基因cDNA的大部分烟草植株的Pn高于对照,结果证明单子叶稗草根型PEPC酶对烟草的光合作用具有一定的调节作用.