电针通过调控胞质型磷脂酶A2表达减少脊髓损伤大鼠脊髓神经细胞凋亡

摘要

目的:观察电针对脊髓损伤(SCI)大鼠胞质型磷脂酶A2 (cPLA2)的表达和神经细胞凋亡的影响,探讨电针治疗SCI的部分机制。方法:SD大鼠随机分为假手术组、模型组、电针组、阻断剂组和电针+阻断剂组,每组18只。采用改良Allen重物打击法制备SCI模型。电针组取“大椎”“腰阳关”及双侧“次髎”“足三里”进行电针治疗,每次20 min,每日1次,共14次;阻断剂组予以花生甙三氟甲基酮隔日1次腹腔注射。治疗结束对各组大鼠进行BBB评分;Western blot法检测各组大鼠脊髓组织cPLA2、磷酸化(p)-cPLA2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)蛋白的表达;荧光定量PCR法检测各组大鼠脊髓组织cPLA2、Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA的表达;尼氏染色观察脊髓组织形态变化。结果:与假手术组比较,模型组大鼠BBB评分明显降低(P<0.01),脊髓组织形态明显受损;与模型组比较,各治疗组大鼠BBB评分升高(P<0.01),脊髓组织形态都有所改善;电针+阻断剂组BBB评分高于电针组、阻断剂组(P<0.01,P<0.05),且脊髓组织形态改善优于电针组、阻断剂组。与假手术组比较,模型组大鼠脊髓组织Bcl-2蛋白及mRNA表达水平降低(P<0.01),Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,各治疗组大鼠脊髓组织Bcl-2蛋白及mRNA表达水平升高(P<0.05,P<0.01),治疗各组Bax、Caspase-3蛋白表达水平降低(P<0.01,P<0.05),阻断剂组、电针+阻断剂组大鼠脊髓组织Bax mRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),电针+阻断剂组Caspase-3 mRNA表达水平降低(P<0.05);电针+阻断剂组Bax mRNA表达水平明显低于电针组(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠脊髓组织p-cPLA2蛋白及cPLA2 mRNA表达水平升高(P<0.01);与模型组比较,除电针组cPLA2 mRNA外,各治疗组大鼠脊髓组织p-cPLA2蛋白及cPLA2 mRNA表达水平都明显低于模型组(P<0.01);电针+阻断剂组cPLA2mRNA表达水平低于电针组(P<0.01)。结论:电针通过抑制cPLA2的活性,进而升高Bcl-2、降低Bax及Caspase-3表达,减少神经细胞的凋亡,达到改善SCI大鼠神经功能的作用。