电针预处理通过下调瞬时受体电位阳离子通道蛋白6抑制肾小管上皮细胞凋亡

摘要

目的:观察电针预处理对链脲佐菌素(STZ)诱导的高血糖小鼠肾小管上皮细胞凋亡的影响,探讨电针预处理对高血糖小鼠肾损伤的保护机制。方法:C57BL/6小鼠随机分为对照组、模型组、电针组及假电针组,每组20只。模型组、电针组及假电针组小鼠连续5 d腹腔注射STZ(50 mg·kg^(-1)·d^(-1))复制高血糖模型。电针组小鼠在造模前取“足三里”“肾俞”行电针预处理7 d,30 min/次,假电针组取相同穴位针刺透皮不通电。各组小鼠在造模完成3 d后,尾静脉采血测量禁食6 h后血糖值;HE染色法观察肾组织损伤程度;TUNEL染色法观察肾小管上皮细胞凋亡;Western blot法及免疫组织化学法检测肾组织中瞬时受体电位阳离子通道蛋白6(TRPC6)表达及相关凋亡蛋白Caspase-3、Bax、Bcl-2蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组血糖、肾小管上皮细胞凋亡比例及肾脏TRPC6、Caspase-3、Bax表达明显升高(P<0.001,P<0.0001),肾组织损伤明显,Bcl-2表达、Bcl-2/Bax比值明显下降(P<0.0001);与模型组及假电针组比较,电针组血糖、肾小管上皮凋亡细胞比例及肾脏TRPC6、Caspase-3、Bax表达下降(P<0.01,P<0.0001,P<0.05,P<0.001),肾组织损伤程度较轻,Bcl-2表达、Bcl-2/Bax比值明显升高(P<0.01,P<0.05,P<0.001)。HE染色结果显示模型组小鼠肾小球内毛细血管管腔异常扩张,近端小管刷状缘消失,而电针组则相对较轻。结论:电针预处理可抑制血糖升高,减少肾小管上皮细胞凋亡,其可能机制是下调TRPC6的表达以减少钙内流,使得Bcl-2/Bax比值升高,Caspase-3表达减少。