达格列净对棕榈酸诱导的人肾小管上皮细胞损伤的保护机制研究

摘要

目的探讨达格列净对棕榈酸诱导的人肾小管上皮细胞的保护作用及机制。方法体外培养人肾小管上皮细胞(HK-2),分为正常对照(CON)组、棕榈酸(PA)组、棕榈酸+达格列净(PA+Dapa)组、单纯达格列净(Dapa)组,干预24 h后采用CCK-8法检测细胞增殖力,DCF免疫荧光检测细胞内活性氧(ROS)水平,JC-1荧光检测线粒体膜电位,试剂盒检测细胞内超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)含量,Western blot检测凋亡蛋白caspase3、Cleaved caspase3和细胞色素C(Cyto C)水平,Hoechst33258荧光检测细胞凋亡情况。结果与CON组比较,PA组细胞增殖力降低,ROS水平升高,线粒体膜电位下降,SOD水平降低及MDA水平升高,凋亡蛋白caspase3和Cleaved caspase3水平升高以及Cyto C水平表达量增加,Hoechst33258检测凋亡水平增加,差异均有统计学意义(P<0.05);Dapa组以上指标与CON组比较差异无统计学意义;与PA组比较,PA+Dapa组细胞增殖力升高,ROS水平降低,线粒体膜电位上升,SOD水平升高、MDA水平降低,凋亡蛋白caspase3、Cleaved caspase3及Cyto C蛋白表达量降低,Hoechst33258检测凋亡水平下降,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论达格列净对棕榈酸诱导的人肾小管上皮细胞具有保护作用,机制可能与改善线粒体功能及氧化应激水平有关。