hMSCs来源的外泌体对单核细胞增殖和分泌炎性因子的影响

摘要

目的 研究人间充质干细胞(hMSCs)来源的外泌体对单核细胞增殖和分泌炎性因子的影响,初步探讨外泌体的免疫调节功能.方法 离心法培养hMSCs,收集培养的hM-SCs上清液,利用试剂盒提取外泌体,电镜下观察其结构,Western blot检测其CD63和CD81的表达水平.密度梯度离心法分离外周血单核细胞,在培养的单核细胞中加入外泌体,MTT法检测单核细胞的增殖情况,流式细胞仪检测其凋亡情况,ELISA法检测上清液中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)及白介素-8(IL-8)的分泌量.结果 hMSCs来源的外泌体在透射电镜下呈小球状,Western blot显示外泌体CD63和CD81表达阳性.MTT检测显示,在LPS的刺激下,单核细胞增殖增加;加入外泌体后单核细胞的增殖受到抑制.流式细胞仪检测结果表明外泌体具有促进单核细胞凋亡的作用.ELISA检测结果表明,外泌体能够抑制炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-8的分泌.结论 hMSCs来源的exosmes能够抑制单核细胞的增殖并促进其凋亡,同时抑制了单核细胞分泌炎性因子TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-8.初步证明了hMSCs来源的外泌体具有免疫调节功能.