褪黑素对肝星状细胞中PI3K/AKT信号通路的影响

摘要

目的 探究褪黑素对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的肝星状细胞系(HSC-T6)中PI3K/AKT信号通路的影响.方法 将HSC-T6细胞分成5组:对照组、模型组、褪黑素低浓度组(1 nmol/L)、褪黑素中浓度组(1μmol/L)、褪黑素高浓度组(0.1 mmol/L).培养箱培养24 h后,用无血清培养基培养,除对照组外,其余各组均加入TGF-β1,在三组不同浓度的褪黑素组加入对应浓度的褪黑素,药物作用48 h.MTT检测褪黑素对HSC-T6细胞增殖的影响;细胞免疫组化检测褪黑素对HSC-T6细胞中P-AKT蛋白表达的影响;Western blot检测褪黑素对HSC-T6细胞中PI3K和P-AKT蛋白表达的影响;qPCR检测褪黑素对HSC-T6细胞中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA表达的影响.结果 与对照组相比,TGF-β1能显著诱导HSC-T6细胞增殖(P<0.01),增强PI3K和P-AKT蛋白的表达(P<0.01),增强α-SMA mR-NA的表达(P<0.01);与模型组相比,褪黑素高浓度组能显著抑制HSC-T6细胞增殖(P<0.01),褪黑素能明显抑制PI3K和P-AKT蛋白的表达较模型组(P<0.01或P<0.05),褪黑素能明显抑制α-SMA mRNA的表达较模型组(P<0.01).结论 褪黑素能显著抑制HSC-T6细胞增殖,其作用机制可能与抑制PI3K/AKT信号通路有关.