万古霉素对hVISA生物膜构成的影响

摘要

目的 探讨万古霉素对异质性万古霉素中介金黄色葡萄球菌(hVISA)生物膜构成的影响,及其与万古霉素治疗hVISA失败率高的关系.方法 将临床菌株hVISA(05307)和Mu3(ATCC 700698,hVISA的参考菌株)暴露于不同浓度的万古霉素.单独的肉汤和不含抗生素的细菌悬浮液分别作为阴性和阳性对照组.使用结晶紫(CV)染色测量hVISA的生物膜总量,并且使用激光共聚焦显微镜(CLSM)观察生物膜的三维结构.细胞外基质(ECM)中的蛋白质组分,细胞外多糖黏附素(PIA)和细胞外DNA(eDNA)分别采用直接和间接的方法定量.结果 与阳性对照组相比,只有1倍最低抑菌浓度(MIC)的万古霉素处理组增加了hVISA的生物膜总量.另外,各组提取的ECM中PIA和蛋白质的表达没有明显区别.加入DNase I处理后,1×MIC万古霉素处理组的生物膜总量被显著抑制到与万古霉素未处理组相近的水平.结论 1×MIC的万古霉素诱导的eDNA释放是万古霉素增强hVISA生物膜形成主要因素,这可能是万古霉素治疗hVISA感染失败率高的原因之一.