诊断日本血吸虫病双特异性抗体的制备和应用

摘要

目的 制备抗日本血吸虫可溶性虫卵抗原(SEA)/辣根过氧化物酶(HRP)双特异性抗体,并应用于日本血吸虫病的诊断.方法杂交瘤方法制备抗SEA和抗HRP单克隆抗体,分别用化学交联剂DTNB和SPDP将IgG1亚类的两种单克隆抗体经消化、还原氧化获得杂合抗体片段F(ab')2,应用于Dot-ELISA检测日本血吸虫患者血清中的循环抗原.结果杂合抗体片段F(ab')2具有同时识别SEA和HRP的双特异性,在Dot-ELISA试验中检测急性日本血吸虫患者,慢性日本血吸虫患者和晚期日本血吸虫患者血清中循环抗原的结果与同株二价抗SEA单克隆抗体的检测结果经统计学处理显示差异无显著性(P＞0.05).结论 IgG1亚类的单克隆抗体可用化学交联法制备出相应的双特异性抗体片段,应用于Dot-ELISA检测日本血吸虫患者血清中的循环抗原,显示了较好的特异性和敏感性;并可减少实验步骤,节约实验时间,为诊断日本血吸虫病提供了快捷的手段.