抑制MEK/ERK消除胃腺癌细胞对内质网应激性凋亡的耐受

摘要

目的 了解内质网应激诱导胃腺癌细胞凋亡情况及其作用途径,并探讨MEK/ERK信号途径在其中发挥的作用.方法 流式细胞仪PI单染法检测细胞周期DNA含量分析凋亡率,DAPI染色后荧光显微镜观察药物处理后死亡细胞形态特征及各组死亡差别,免疫印迹法(Western blot)检测衣霉素以及U0126诱导前后p-ERK、caspase-3、PARP的表达变化.结果 不同浓度衣霉素(TM)诱导胃腺癌细胞48h凋亡率最高仅为15.65%,TM诱导ERK活化形式p-ERK表达增加,而在U0126处理后下调.U0126与TM共同作用于胃腺癌细胞时,凋亡率显著升高至38.3%±2.78%.荧光显微镜可观察到细胞内典型的凋亡小体,凋亡细胞比TM单独作用明显增多.U0126作用后TM诱发胃腺癌细胞caspase-3、PARP剪切、活化.结论 TM可诱导胃腺癌细胞发生内质网应激反应性凋亡并且激活MEK/ERK信号通路,但对其相对不敏感.通过阻断MEK/ERK信号途径后能杀死大量胃腺癌细胞,caspase-3、PARP的活化表明胃腺癌细胞的内质网应激性凋亡依赖于caspase途径.