干扰素刺激应答元件介导IFN-α-2b对IFP35的转录调控

摘要

IFP35为分子量35 kDa的干扰素诱导蛋白,可以被Ⅰ型干扰素诱导表达,但是其受干扰素调控机制未知.为了阐明Ⅰ型干扰素对IFP35的转录调控机制,克隆了IFP35基因翻译起始点上游242 bp(-359～-118)的序列,将之置于萤火虫荧光素酶基因上游,构建报告质粒pGL-359,瞬时转染实验证实,该段序列具有启动子活性;序列分析表明其为GC box型启动子,-181～-170 bp序列符合干扰素刺激应答元件(interferon stimulate response element,ISRE)特征.用IFN-α-2b处理细胞后,pGL-359活性可提高达3.1倍,但突变pGL-359上的ISRE特征序列后,该突变启动子不再响应IFN-α-2b刺激.随后的凝胶电泳阻滞实验发现,用IFN-α-2b处理HeLa细胞后,其核蛋白可与IFP35启动子上的ISRE元件形成明显的阻滞带,表明ISRE介导了IFN-α-2b对IFP35的转录调控.