LC-MS/MS法同时测定人血浆中维拉帕米和代谢产物去甲维拉帕米

摘要

建立一种简便、灵敏的同时测定人血浆中维拉帕米和去甲维拉帕米浓度的液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS）的分析方法,并用于健康人体的药代动力学研究。血浆样品经甲醇沉淀蛋白后,使用Agilent Zorbax Eclipse C18色谱柱（50 mm×4.6 mm, 5μm）分离,以0.1%甲酸-5%乙腈-10 mmol·L-1甲酸铵水溶液作为水相,甲醇-乙腈（50∶50, v/v）溶液作为有机相, 0.5 m L·min-1的流速进行梯度洗脱,采用电喷雾离子源（ESI）,多反应（MRM）正离子监测模式对维拉帕米、去甲维拉帕米及内标维拉帕米-d6进行定量检测,监测离子对分别为m/z 445.0→165.2、m/z 441.0→165.2和m/z 461.1→165.2。本文建立的同时测定人血浆中维拉帕米及去甲维拉帕米浓度的LC-MS/MS方法的定量下限（LLOQ）为0.1 ng·m L-1,且在0.1～50 ng·m L-1浓度内线性关系良好（r~2＞ 0.997）。维拉帕米及去甲维拉帕米的基质效应分别在99.2%～100%和101%～102%之间,该方法前处理简便快速,灵敏度高,能准确同时测定人血浆中维拉帕米及去甲维拉帕米浓度,方法验证后并经伦理委员会批准后应用于健康人体的药动学研究。