多种蚊媒病毒x-TAG悬浮芯片复合检测方法的建立

摘要

建立多重检测东方马脑炎病毒、西方马脑炎病毒、委内瑞拉马脑炎病毒、基孔肯亚病毒、登革病毒、日本脑炎病毒、黄热病毒、西尼罗病毒、圣路易斯脑炎病毒、版纳病毒、布尼亚病毒、裂谷热病毒的悬浮芯片方法.将十二种蚊媒病毒分为3组,每组使用标记有不同anti-TAG的上游引物及标记有生物素的下游引物对分别构建多重PCR体系,PCR产物与偶联了x-TAG的编码磁性微球进行杂交,最后利用Bio-plex100分析系统对12种蚊媒病毒分别进行单一、多重液相芯片检测.将平均荧光强度的判定阈值定为背景对照的3倍,多批次实验均能对十二种单一病毒样本和混合病毒样本进行准确鉴定,未出现交叉反应,表明该方法特异性较好.敏感性测试结果显示本检测方法具有高灵敏度.通过利用偶联有TAG及生物素的引物对,成功建立了可同时检测12种蚊媒病毒的液相芯片检测技术平台.该平台对于病原体的检测具有较好的应用前景.