大黄栓制剂对两种溃疡性结肠炎模型小鼠的作用研究

摘要

目的：构建2,4,6-三硝基苯磺酸（2,4,6-trinitrobenzene sulfonic acid,TNBS）和恶唑酮（oxazolone,OXZ）诱导的小鼠溃疡性结肠炎（ulcerative colitis,UC）模型,观察大黄栓剂对UC的治疗作用。方法：将420只昆明小鼠（♂）随机分为2组（n=210）制备小鼠TNBS和OXZ模型。Ⅰ组（TNBS模型组）将昆明小鼠（♂）随机分为7组（n=30）：A（TNBS模型组）、B（柳氮磺胺吡啶（sulfasalazine,SASP）栓剂组）、C（大黄800 mg·kg-1栓剂组）、D（大黄400 mg·kg-1栓剂组）、E（大黄200 mg·kg-1栓剂组）、F（空白栓剂组）、G（TNBS溶剂对照组）。Ⅰ组（AE）：0.6%TNBS溶液0.1 m L灌肠;Ⅰ组（F）：不做任何处理;Ⅰ组（G）：50%乙醇0.1 m L灌肠;以上7组自灌肠一次后在d 1、d 2、d 3、d 5、d 7每组处死6只。Ⅱ组（OXZ模型组）将昆明小鼠（♂）随机分为7组（n=30）：A（OXZ模型组）、B（SASP栓剂组）、C（大黄800 mg·kg-1栓剂组）、D（大黄400 mg·kg-1栓剂组）、E（大黄200 mg·kg-1栓剂组）、F（空白栓剂组）、G（OXZ溶剂对照组）。Ⅱ组（AE）：皮肤涂抹1%OXZ溶液（100%乙醇溶解）0.1 m L每天一次,连续2 d（致敏）,d 7以0.5%OXZ（50%乙醇溶解）0.1 m L灌肠;Ⅱ组（F）：不做任何处理;Ⅱ组（G）：皮肤涂抹100%乙醇0.1 m L,每天一次,连续2 d,d 7以50%乙醇0.1 m L灌肠;以上7组灌肠给药一次后在d 15每天处死6只小鼠。观察Ⅰ组,Ⅱ组小鼠疾病活动指数（disease activity index,DAI）、结肠组织大体损伤指数（colon macroscopic damage index,CMDI）和病理组织学评分（histopathological score,HPS）,并检测小鼠结肠组织中髓过氧化物酶（myeloperoxidase,MPO）、白细胞介素-4（interleukin-4,IL-4）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）的水平。结果：Ⅰ组（A）小鼠的DAI、CMDI、HPS、MPO酶活性、IL-4含量、TNF-α表达含量与Ⅰ组（G）比较在d 1、d 2、d 3、d 5、d 7均有明显改变;Ⅰ组给予含药栓剂组（BE）与Ⅰ组空白栓剂组（F）相比,小鼠的DAI、CMDI、HPS、MPO酶活性、IL-4含量、TNF-α表达在d 1、d 2、d 3、d 5、d 7均有差异;Ⅰ组大黄不同剂量组（CE）与Ⅰ组SASP栓剂组（B）相比,在d 1、d 2、d 3、d 5、d 7均有变化,其中大黄200 mg·kg-1栓剂组（E）差异较小。Ⅱ组（A）小鼠的DAI、CMDI、HPS、MPO酶活性、IL-4含量、TNF-α表达含量与Ⅱ组（G）比较在d 15差异均有显著性;Ⅱ组给予含药栓剂组（BE）与Ⅱ组（F）相比在d 15均有变化,其中大黄给药组（CE）差异有显著性;Ⅱ组大黄不同剂量组（CE）与Ⅱ组SASP栓剂组（B）相比在d 15均有变化,其中大黄200 mg·kg-1栓剂组（E）差异较小。结论：TNBS与OXZ均能成功诱导小鼠UC模型;大黄对小鼠UC有一定的治疗作用,以大黄200 mg·kg-1剂量疗效较佳,但是不及SASP效果。