苏云金芽胞杆菌鲇泽亚种HD-133 cry1D的表达调控

摘要

利用PCR扩增基因cryID启动子及上游区片段,在测序的基础上构建含cryID-lacZ融合基因穿梭质粒,导入不同遗传背景的苏云金芽胞杆菌菌株中,并以crylA6-lacZ融合基因为对照测定β-半乳糖苷酶活性,检测启动子上游区的作用.结果表明,cry1D-lacZ和crylAb-lacZ融合基因在不同遗传背景的菌株中表达完全不同,也许一些宿主专一性的因子参与了转录调控;而在同一菌株中CcryID-lacZ和crylAb-lacZ的表达差异是由于上游区的不同以及竞争有限的σ因子所致.利用PCR定点诱变技术突变其SD序列GGGGA为GGAGG后,crylD-lacZ融合基因的表达提高了1.0～1.6倍.表明GGAGG是苏云金芽胞杆菌合适的SD序列,也揭示了不合适的SD序列是cwID表达量低的原因之一.