枯草芽孢杆菌基因启动子的分离与鉴定

摘要

利用启动子探针型载体pSUPV4直接在大肠杆菌(Escherichia coli)中分离枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)WB600的基因启动子片段,获得55个具有卡那霉素抗性的重组子.对3个抗性最高的重组子pSU-Bs2,pSU-Bs4,pSU-Bs8进行序列测定和同源性分析发现,所克隆到的基因启动子片段均来自于枯草芽孢杆菌的基因组,并且具有枯草杆菌基因启动子的保守序列.对抗性最高的Bs2片段进一步研究表明,它可以在大肠杆菌中高效地启动来自于短小芽孢杆菌的碱性蛋白酶基因的表达, 也能在枯草芽孢杆菌中启动卡那霉素抗性基因的表达.