利用8质粒系统拯救A/Chicken/Shanghai/F/98(H9N2)株禽流感病毒

摘要

应用反向遗传技术将含有1998年中国大陆分离株H9N2亚型禽流感病毒(Avian influenza virus,AIV)的8个基因片段的质粒共转染COS-1细胞,产生了与野生病毒生物学特性相同的H9N2亚型AIV.将A/Chicken/Shanghai/F/98(CK/SH/F/98)株H9N2亚型AIV的8个基因组cDNA分别克隆到polⅠ-polⅡ转录/表达载体pHW2000中,构建成8个转录/表达载体重组质粒.将这8个质粒共转染COS-1细胞,24h后收获细胞及上清接种SPF鸡胚,48h后收取鸡胚尿囊液继续进行鸡胚传代,产生能致死鸡胚的病毒.经血凝、血凝抑制试验、序列分析和电镜观察,证实产生了CK/SH/F/98(H9N2)株AIV.