J亚群白血病病毒NX0101株感染性克隆化病毒的构建及其致病性

摘要

采用PCR方法分3段扩增出J亚群白血病病毒NX0101株的前病毒cDNA,PCR产物经克隆后顺次连接,获得一个含有完整ALV-J前病毒cDNA的重组质粒,命名为pALV-J-NX.将此质粒DNA纯化后转染鸡胚成纤维细胞,以针对ALV-J的单克隆抗体JE9对转染后的细胞作间接免疫荧光反应,证明获得了具有感染性的病毒.测定原始野毒和分子克隆化病毒的半数组织感染量(TCID50),分别人工接种1日龄商品代肉鸡并隔离饲养17周.接种野毒组死亡率为26%,髓细胞瘤发病率为24%.接种分子克隆化病毒组死亡率为22%,髓细胞瘤发病率为22%.结果表明,克隆化病毒具有天然病毒的致病性并对肉用型鸡表现致瘤性.