腾冲嗜热厌氧菌热休克蛋白60及其基因表达的热激动态变化分析

摘要

热休克蛋白60(HSP60)是细菌体内一种非常重要的分子伴侣,其可以协助蛋白质或肽链的正确折叠和构型,防止变性和降解.基于本实验室的早期观察,腾冲嗜热厌氧菌的HSP60是一个典型的温度相关蛋白质,在80℃的表达水平最高.为了进一步了解嗜热菌应急的分子机制,继续进行了在热激后HSP60基因表达的动态研究.将最适温度(75℃)下培养的腾冲嗜热厌氧菌迅速地转移至80℃继续培养,然后在不同的时间点上分别取样,并通过双向电泳、Western blot和Real-time PCR等方法,分析了HSP60在mRNA和蛋白质水平上的表达量的改变.试验结果表明,在80℃热处理4h内的短期应急过程中,HSP60蛋白水平一直呈上升趋势,而它的mRNA水平则表现为先升高后下降的一个非对称性的峰形变化.HSP60的mRNA和蛋白质的对温度的应答快慢程度是不同的.HSP60的mRNA水平的显著变化在1h内便可观察到,而蛋白质水平的显著改变要延迟3h左右.此外,HSP60的mRNA和蛋白质对温度的应答量变大小也是不同的.