产朊假丝酵母整合表达载体的构建

摘要

【目的】构建一个产朊假丝酵母(Candida utilis,C.utilis)整合表达载体。【方法】该载体以质粒pBR322为骨架,包括3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAP)启动子和终止子、放线菌酮(CYH)抗性基因和18SrDNA介导的同源整合区。再以木聚糖酶基因为目标基因,插入pGLR9K载体上,构建重组表达载体,电击转化C.utilis。对阳性转化子进行酶活测定,检测其表达情况。【结果】转化子的胞内外都可检测到木聚糖酶酶活,酶活可达60U/mL。【结论】本实验构建了一个C.utilis载体,并用此载体表达了木聚糖酶基因,本研究将为产朊假丝酵母工程菌在饲料添加剂及食品行业中的应用提供又一个新的实验平台。