产甘油假丝酵母(Candida glycerinogenes)染色体倍性分析

摘要

【目的】产甘油假丝酵母作为一株优良高产甘油菌株,已成功应用于工业生产15年。近年来由于产甘油假丝酵母染色体倍性尚不明确,限制了对其进行遗传改造的研究进展,因而我们对产甘油假丝酵母染色体倍性进行研究,分析确定其染色体倍性。【方法】选用酿酒酵母细胞进行生孢,制备酿酒酵母单倍体细胞作对照,并选用热带假丝酵母作为二倍体酵母细胞对照,利用血球计数板得到热带假丝酵母、产甘油假丝酵母、单倍体及二倍体酿酒酵母细胞数,提取染色体,通过二苯胺检测法测定DNA含量。由于在相同紫外照射条件下单倍体细胞比二倍体细胞更容易死亡,因而进行紫外照射试验进行进一步验证。【结果】通过筛选得到所需的酿酒酵母单倍体细胞,并测定得到以上4种酵母单位细胞染色体DNA的含量,通过分析得出单细胞产甘油假丝酵母的染色体DNA含量为单倍体酿酒酵母细胞的1.82倍,为二倍体酿酒酵母的0.848倍,为热带假丝酵母的0.97倍,因而初步确定产甘油假丝酵母为二倍体;通过紫外照射进一步得到验证其为二倍体。【结论】本文通过测定细胞染色体DNA含量并经紫外照射验证分析得出Candida glycerinogenes细胞为二倍体,为对其进行进一步研究和改造奠定了一定的遗传学基础。