三结构域重组纤连蛋白多肽在大肠杆菌中表达及其产物的纯化与鉴定

摘要

在大肠杆菌中表达了一种抗肿瘤转移多肽--人纤连蛋白(FN)的Cell I-Hep Ⅱ-Cell Ⅱ三结构域重组多肽(CH82),表达效率达21%.在低温(22 ℃)培养表达时,CH82大部分为可溶性产物,经DEAE-52层析及 Heparin-agarose亲和层析可得到纯品;在高温(37 ℃)培养表达时,CH82主要以包涵体形式出现,经尿素变性与复性处理后,可通过Heparin-agarose亲和层析得到纯品. 所得纯品均具有结合肝素和结合细胞的功能,且结合细胞的能力比双结构域FN更强,表明两个结合细胞的功能结构域均有活性.