LCMV-CL13慢性感染小鼠模型的建立及其BCR突变分析

摘要

目的建立淋巴细胞性脉络丛脑膜炎病毒LCMV-CL13慢性感染小鼠模型,分析其作为B细胞受体高频突变研究模型的可能性。方法C57BL/6N小鼠经尾静脉途径接种2×10^(6)PFU剂量LCMV-CL13病毒,感染后第10、20、30、40、50、60、70天采集样品,通过qPCR检测组织病毒载量,流式检测分析外周血CD4^(+)T、CD8^(+)T、CD19^(+)B细胞及脾生发中心B细胞比例,免疫组库测序分析BCR V区基因丰度及突变率。结果在LCMV-CL13病毒感染小鼠体内检测到1×10^(6)copies/μL水平的病毒复制;在感染平台期,小鼠外周血CD4^(+)T细胞比例逐渐升高(13.15%±0.72%),CD8^(+)T细胞先降低(2.17%±0.40%)后逐渐恢复(6.65%±0.52%),CD19^(+)B细胞以及生发中心B细胞比例分别增加至(40.32%±0.46%)和(10.03%±0.60%);测序结果证明BCR重链V基因使用频率下降、突变率显著性升高(P<0.05)。结论成功建立LCMV-CL13慢性感染小鼠模型;此模型可用于BCR突变研究,为研究慢性病毒感染导致的B细胞高频突变奠定了基础。